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貨源介紹

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　　DU 145細(xì)胞是從一位有3年淋巴細(xì)胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉(zhuǎn)移病灶損害中建株的。DU 145細(xì)胞和從軟瓊脂中分離到的細(xì)胞不具有可檢測的激素敏感性，酸性磷酸酶呈弱陽性。對DU 145細(xì)胞及原始腫瘤細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu)分析可見微絨毛，微絲及細(xì)胞橋粒，有許多線粒體，發(fā)育良好高爾基體和異質(zhì)溶酶體。DU 145細(xì)胞不表達(dá)前列腺抗體。
　　
　　種屬：人
　　
　　年齡（性別）男；69歲
　　
　　組織來源：前列腺；轉(zhuǎn)移灶；腦癌
　　
　　生長特性:貼壁
　　
　　細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
　　
　　生長培養(yǎng)基:MEM＋10% FBS)＋1% P/S
　　
　　培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%溫度：37℃
　　
　　傳代步驟
　　
　　如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
　　
　　棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次；
　　
　　加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化；
　　
　　按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻；
　　
　　收到細(xì)胞后首次傳代推薦將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2到1:4的比例進(jìn)行。
　　
　　凍存步驟
　　
　　細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)；
　　
　　4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識；
　　
　　將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
　　
　　細(xì)胞用途
　　
　　僅供科研使用。
　　
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